-
免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗失敗了千萬不要慌!
發(fā)布時間: 2022-11-03 點擊次數(shù): 1014次免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染在細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)中占據(jù)重要地位,廣泛用于基因與蛋白功能研究,成為實驗室工作中的常規(guī)技術(shù)手段之一。沒有一種方法適用于所有的細(xì)胞和實驗,需要根據(jù)細(xì)胞類型和實驗進行選擇。理想的方法應(yīng)具有高轉(zhuǎn)染效率,低細(xì)胞毒性和對正常生理學(xué)的影響最小,并且易于使用和具有可重復(fù)性等特點。常用于哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法有磷酸鈣法、陽離子脂質(zhì)體法、病毒轉(zhuǎn)染法和電穿孔法。然而,免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗出現(xiàn)失敗也不要驚訝,常見的異常結(jié)果是細(xì)胞大量死亡、轉(zhuǎn)染效率不高、重復(fù)實驗不穩(wěn)定。如何找到問題所在,讓實驗順利進行,就顯得比較重要。例如細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗失敗導(dǎo)致細(xì)胞大量死亡如何處理我們根據(jù)以下的分析來針對性解決:1.細(xì)胞狀態(tài)不佳:選擇生長旺盛的細(xì)胞進行轉(zhuǎn)染實驗。2.核酸純度不夠或內(nèi)毒素過高:采用高質(zhì)量核酸與去內(nèi)毒素的核酸。3.目的蛋白對細(xì)胞的毒性:嘗試進行再設(shè)計。4.轉(zhuǎn)染試劑過多:降低轉(zhuǎn)染試劑的量;轉(zhuǎn)染后4-6h換液。5.污染:排查污染源或重新復(fù)蘇細(xì)胞。6.抗生素存在:特別是陽離子脂質(zhì)體試劑增加了細(xì)胞的通透性,使抗生素可以進入細(xì)胞,降低細(xì)胞的活性,導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率降低,可降低抗生素濃度或不使用抗生素。7.營養(yǎng)不足:如果無血清條件下轉(zhuǎn)染的,要根據(jù)狀態(tài)及時補充營養(yǎng)。- 下一篇:DAPI染DNA的原理及使用方法
- 上一篇:測定蛋白含量都有哪些方法?
產(chǎn)品中心
Products
-
血清系列
-
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
-
支原體清除
-
細(xì)胞凍存
-
實驗耗材
-
分子試劑
-
細(xì)胞增殖與凋亡
-
Biozellen系列
-
培養(yǎng)基
-
ELISA試劑盒
-
TOYOBO(東洋紡)
-
ZYMO RESEARCH
-
Greiner(格瑞納)
-
IKA(艾卡)
-
化學(xué)發(fā)光底物(ECL)
-
PROSPEC系列
-
Epigentek系列
-
微生物檢測
-
細(xì)胞生物學(xué)
-
Corning康寧
-
解離試劑
-
細(xì)胞類-實驗耗材
-
原代細(xì)胞
-
植物檢測系列試劑盒
-
SERANA
-
細(xì)胞系
-
生化試劑盒
-
環(huán)境檢測系列試劑盒(AKEN)
-
類器官培養(yǎng)
-
緩沖器和解決方案
-
生物三凝膠基質(zhì)
-
細(xì)胞因子分子
-
生物樣本庫