常用的卵巢癌細(xì)胞的培養(yǎng)及細(xì)胞表達(dá)

發(fā)布時(shí)間： 2021-10-09　　點(diǎn)擊次數(shù)： 4250次

整理一篇關(guān)于卵巢癌細(xì)胞的培養(yǎng)方法和細(xì)胞的特征特點(diǎn)，由于卵巢癌早期缺少癥狀，即使有癥狀也不特異，篩查的作用又有限，因此早期診斷比較困難，就診時(shí)60%～70%已為晚期，而晚期病例又療效不佳，卵巢癌方向的研究也成為了目前基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究重點(diǎn)，下面我們分享部分我們實(shí)驗(yàn)室有的卵巢細(xì)胞株的培養(yǎng)方法和特征。

部分細(xì)胞形態(tài)

CELL Name：NIH OVCAR

Cell Name：SK-OV-3

細(xì)胞系	形態(tài)特征	培養(yǎng)基	其他
ID8小鼠卵巢表面上皮細(xì)胞	單層，貼壁生長(zhǎng)	90%DMEM高糖(MD0100)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A 雙抗(SD0038) DMEM*培養(yǎng)基（貨號(hào)：MD0101）；氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。	在C57BL/6小鼠體內(nèi)，可導(dǎo)致腹腔腫瘤和腹水的形成；常被用作卵巢癌的同基因小鼠模型
caov-3 人；卵巢腺癌細(xì)胞	來(lái)源于卵巢組織；上皮細(xì)胞樣	90%DMEM(MD0100)+10%胎牛血清(SD0200)+SP（SD0008）+G/A (SD0038) DMEM培養(yǎng)基（貨號(hào)：MD0125）氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度凍存液：無(wú)血清細(xì)胞凍存液（SD0002）
Caov-4 人；腺癌	來(lái)源于轉(zhuǎn)移部位：輸卵管的漿膜下層；上皮細(xì)胞；貼壁	Leibovitz的 L-15 培養(yǎng)基加入20%胎牛血清FBS
CHO 倉(cāng)鼠；卵巢細(xì)胞		90%F12K(MD0400)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038) 培養(yǎng)基：F12K培養(yǎng)基（貨號(hào)：MD0401）氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS *凍存液：無(wú)血清細(xì)胞凍存液（SD0002）
CHO-K1 倉(cāng)鼠；卵巢細(xì)胞亞株	來(lái)源于卵巢組織；上皮細(xì)胞	90%F12K(MD0400)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038) 培養(yǎng)基：F12K培養(yǎng)基（貨號(hào)：MD0401）氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200) *凍存液：無(wú)血清細(xì)胞凍存液（SD0002）
CHO/dhFr- 倉(cāng)鼠；卵巢細(xì)胞,二氫葉酸還原酶缺陷	來(lái)源于正常卵巢組織；上皮細(xì)胞	IMDM培養(yǎng)基加入10%優(yōu)質(zhì)胎牛血清FBS；添加0.1mM次黃嘌（漂）呤，0.016mM胸腺嘧啶，100nM氨甲喋呤。	該細(xì)胞為二氫葉酸還原酶缺陷細(xì)胞。在沒(méi)有HT（次黃嘌（漂）呤-胸腺嘧啶）時(shí)細(xì)胞會(huì)死亡。細(xì)胞培液中加氨甲喋呤可以防止對(duì)藥物低抗性的回變細(xì)胞的生長(zhǎng)。
CTLA4 Ig-24倉(cāng)鼠；卵巢細(xì)胞	來(lái)源于卵巢組織；上皮細(xì)胞	90%DMEM(MD0100)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038) DMEM培養(yǎng)基（貨號(hào)：MD0101）氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200) 凍存液：無(wú)血清細(xì)胞凍存液（SD0002）
ES-2 人；卵巢透明細(xì)胞癌	來(lái)源于低分化卵巢透明細(xì)胞癌組織；成纖維細(xì)胞；貼壁；致癌	90%McCOY's 5A（MD0900）+10%胎牛血清(SD0200)+G/A (SD0038) 培養(yǎng)基：McCOY's5A培養(yǎng)基（貨號(hào)：MD0901）氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。 *凍存液：無(wú)血清細(xì)胞凍存液（SD0002）	在裸鼠中成瘤。該細(xì)胞對(duì)多種化療藥物包括doxorubicin, cisplatin, carmustine, etoposide 和cyanomorpholinodoxorubicin (MRA-CN)表現(xiàn)出低到中等的耐受性。ES-2細(xì)胞表達(dá)低水平的P糖蛋白。
HEY 人；III期卵巢乳頭狀囊腺癌	來(lái)源于子房組織；上皮細(xì)胞；貼壁；致癌	90%1640基礎(chǔ)(MD0200) +10%FBS(SD0100)+1%GA(SD0038) 培養(yǎng)基鏈接：1640培養(yǎng)基（MD0201) 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200) *凍存液：無(wú)血清細(xì)胞凍存液（SD0002）	HEY細(xì)胞系對(duì)烷基化劑順二胺二氯鉑（II）（順鉑）表現(xiàn)出一定程度的抗性
HO-8910 人；卵巢癌細(xì)胞	來(lái)源于卵巢癌病人腹水中；上皮細(xì)胞樣	RPMI-1640(添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，加入10%胎牛血清。	轉(zhuǎn)移到裸鼠中形成的腫瘤集聚與患者原病灶處的形態(tài)一致。
HO-8910PM人；高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞		RPMI-1640(添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，加入10%胎牛血清。
Lec1 倉(cāng)鼠；卵巢細(xì)胞	來(lái)源于卵巢組織；上皮細(xì)胞	90%αMEM(MD0804)+10%胎牛血清(SD0100)+肌醇 43.2mg/L（SD0014）+葉酸 8.82mg/L（SD0016）+β-巰基乙醇 7.8mg/L（SD0031）+G/A (SD0038) 培養(yǎng)基：αMEM培養(yǎng)基（貨號(hào)：MD0807）氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200) *凍存液：無(wú)血清細(xì)胞凍存液（SD0002）	Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C)是從脯氨酸缺陷型的CHO克隆 Pro-5中挑選出來(lái)的能抗麥芽凝集素的突變株。Lec1 缺乏稱作GlcNAc-T1的糖基轉(zhuǎn)移酶，從而N-連接碳水化合物被阻斷在Man5GlcNAc2Asn中間體。對(duì)于研究N-連接糖基化改變對(duì)內(nèi)源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的糖蛋白的功能和區(qū)隔化的影響，這些細(xì)胞十分有用。
NIH:OVCAR-3 人；卵巢癌細(xì)胞	來(lái)源于卵巢腺癌病人惡性腹水；上皮細(xì)胞；貼壁；致癌	80%1640(MD0200)+20%胎牛血清(SD0200)+0.01 mg/ml牛胰島素（SD0020）+G/A (SD0038) 培養(yǎng)基：1640培養(yǎng)基（貨號(hào)：MD0220）氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度 *凍存液：無(wú)血清細(xì)胞凍存液（SD0002）	與107細(xì)胞聯(lián)合皮下接種５只裸鼠21天后全部成瘤。NIH-OVCAR-3是研究卵巢癌藥物抗性的一個(gè)合適的模型系統(tǒng)且由于存在激素受體，這對(duì)于激素治療的評(píng)估或許是有用的。
OV-90 人；3級(jí)，IIIC期，惡性乳頭狀漿液性腺癌	來(lái)源于卵巢癌轉(zhuǎn)移部位：腹水；上皮；貼壁；致癌	42%MCDB 105+42%M 199(MD0950)+15%FBS（SD0200）+1%GA(SD0038) 培養(yǎng)基：MCDB105/M199培養(yǎng)基（MD1203）氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS *凍存液：無(wú)血清細(xì)胞凍存液（SD0002）	致病基因：her2/neu +, p53 (mutated,Ser--> Arg mutation at exon 6, codon 215) Ref 表達(dá)角蛋白基因
SK-OV-3 人；卵巢癌細(xì)胞	來(lái)源于卵巢腺癌，腹水轉(zhuǎn)移；上皮細(xì)胞	90%McCOY's 5A（MD0900）+10%胎牛血清(SD0200)+G/A (SD0038) 培養(yǎng)基：McCOY's5A培養(yǎng)基（貨號(hào)：MD0901）氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。 *凍存液：無(wú)血清細(xì)胞凍存液（SD0002）	此細(xì)胞對(duì)腫瘤壞死因子和幾種細(xì)胞毒性藥物包括白喉毒素、順鉑和阿霉素均耐受，
SW 626 人；III期腺癌	來(lái)源于子房組織；上皮細(xì)胞；貼壁；致癌	Leibovitz的 L-15 培養(yǎng)基加入10%胎牛血清FBS
TOV-21G 人；3級(jí)，III期，原發(fā)性惡性腺癌; 透明細(xì)胞癌	來(lái)源于：子房；上皮細(xì)胞；貼壁；致癌	含有1.5g / L碳酸氫鈉的MCDB105培養(yǎng)基和含有2.2g / L碳酸氫鈉的199培養(yǎng)基以1：1混合。再加入15%胎牛血清FBS	致病基因：p53 +（野生型）表達(dá)角蛋白基因
UACC-1598 人；4級(jí)囊腺癌	來(lái)源于子房組織；上皮細(xì)胞樣；貼壁	Leibovitz的L-15培養(yǎng)基加入轉(zhuǎn)鐵蛋白0.01 mg / ml；0.01 mg / ml胰島素；5μg/ mL（55 U / ml）過(guò)氧化氫酶；3.6μg/ mL（0.01 mM）氫化可（啲）的松；70μg/ mL（0.5mM）鄰磷酸乙醇胺；10 ng / ml人重組表皮生長(zhǎng)因子（EGF）；3 ng / ml（0.01μM）雌二醇；0.8 ng / ml（1 pM）Na-L-甲狀腺素；額外的2 mM谷氨酰胺和5%胎牛血清FBS	受體表達(dá)：低表達(dá)表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體致病基因：表達(dá)N-myc，真核翻譯起始因子5A2（eIF-5A2）；低表達(dá)c-erbB2; 不表達(dá)ras 表達(dá)基因：不表達(dá)細(xì)胞角蛋白（MAK-6），黃體酮，ras；低表達(dá)c-erbB2；表達(dá)N-myc，真核翻譯起始因子5A2（eIF-5A2）。
UWB1.289 人；卵巢癌	上皮細(xì)胞樣；貼壁	50%的RPMI-1640培養(yǎng)基和50%的MEGM（來(lái)自Clonetics / Lonza的乳腺上皮生長(zhǎng)培養(yǎng)基（MEGM Bullet Kit; CC-3150）由MEBM基礎(chǔ)培養(yǎng)基和SingleQuot添加劑制成（ATCC不使用慶大霉素 - 兩性霉素B）。加入3%胎牛血清FBS 注意：不要過(guò)濾*培養(yǎng)基。	表達(dá)致病基因：p53 表達(dá)抗體：表達(dá)細(xì)胞角蛋白7（CK-7），鈣網(wǎng)膜蛋白，Wilms的腫瘤蛋白（WT）；不表達(dá)BRCA1 表達(dá)受體：不表達(dá)雌激素和黃體酮
UACC-2727	上皮樣，貼壁	90%L-15(MD1100)+5%FBS(SD0200)+0.01 mg/ml transferrin+0.01 mg/ml insulin+5 µg/mL (55 U/ml) catalase+3.6 µg/mL (0.01 mM) hydrocortisone+70 µg/mL (0.5mM) o-phosphoethanolamine+10 ng/ml human recombinant epidermal growth factor (EGF)+3 ng/ml (0.01 µM) estradiol +0.8 ng/ml (1 pM) Na-L-thyroxine+2 mM glutamine+G/A (SD0038) 定制培養(yǎng)基：L-15培養(yǎng)基（貨號(hào)：MD0000）氣相：空氣，100%；二氧化碳，0%。溫度：37攝氏度凍存條件/Cryopreservation:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS *凍存液：無(wú)血清細(xì)胞凍存液（SD0002）	her2/neu（+）；EGFR（+）；N-myc（+）MAK-6(+)

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